FC酶标仪的原理
酶标仪实际上就是一台变相光电比色计或分光光度计,其基本工作原理与主要结构和光电比色计基本相同。光源灯发出的光波经过滤光片或单色器变成一束单色光,进入塑料微孔板中的待测标本。该单色光一部分被标本吸收,另一部分则透过标本照射到光电检测器上,光电检测器将这一待测标本不同而强弱不同的光信号转换成相应的电信号,电信号经前置放大,对数放大,模数转换等信号处理后送入微处理器进行数据处理和计算,后由显示器和打印机显示结果。
酶标仪的分类
光是电磁波,波长100nm~400nm称为紫外光,人们之所以能够看到色彩,是因为光照射到物体上被物体反射回来。绿色植物之所以是绿色,是因为植物吸收的大部分为红橙光和蓝紫光,但对绿色不吸收,反射出来,所以植物呈现为绿色。酶标仪测定的原理是在特定波长下,检测被测物的吸光值。
随着检测方式的发展,拥有多种检测模式的单体台式酶标仪叫做多功能酶标仪,可检测吸光度(Abs)、荧光强度(FI)、时间分辨荧光(TRF)、荧光偏振(FP)、和化学发光(Lum)。
酶标仪从原理上可以分为光栅型酶标仪和滤光片型酶标仪。光栅型酶标仪可以截取光源波长范围内的任意波长,而滤光片型酶标仪则根据选配的滤光片,只能截取特定波长进行检测。
酶标仪的检查测试
1、检测电源部分的输出电压
电源部分输出电压可以通过检测MUSCU板上X11元件得到,每个点的正确对地电压应该是(顺序为从左至右):5V、0V(地电压)、15V、24V、-15V、0V。
2、光源电压的测试和调节
测量光源电压,如果发现所测的结果不符合规定要求可以调节电源上的R39元件。其操作步骤如下:
⑴打开电源开关,使仪器处在工作状态。
⑵用电压表测量光源电压,正常电压应在6.7~6.9V之间。
⑶选择405nm波长的程序,按“开始”键,同时测量光源处电压,正常值应在7.5~8.1V之间。
⑷如果光源电压不正常,关闭电源开关。旋松测量部分上盖螺丝并移去上盖。
⑸旋松轨道部分的固定螺丝并移动轨道部分(要特别小心以防损伤轨道部分和主板及电源部分的连线!),能看到轨道下面的电源即可。
⑹打开电源开关,调节电源上R39元件,再重复上面步骤2测量光源电压,一直到正确为止。
酶标仪的检验
1、重复性:在一定条件下所获得的独立的测定结果之间的一致性程度即可重复性,可用CV值来表示。在某一特定的滤光片下测定某一块酶标板20次,用统计学方法求出所有测量值的均值和标准差。公式如下:
所有测量值的标准差
CV%=————————————×所有测量值的均值
2、准确性:待测物的测定值与一可接受的参考值之间的差异。此项指标需用雷勃公司标准板(PVT)来测。
测量值-参考值
准确性=——————————×参考值
3、光路检测:将一块酶标板正放测量一次,再将酶标板反放测量一次,查看同一孔吸光值是否相同,从而查看其所有光路8通道是否均一。
⑴查看光路上的透镜是否清洁。
⑵灯泡好否及亮度是否正常。
⑶滤光片是否清洁。
4、载轨运动:开机后酶标仪能否自检,自检结束后揿“开始”,查看载轨运动是否正常及有无噪声。
5、按键膜的好坏:开机后试用所有按键膜,查看其功能是否完好。